tailieunhanh - Báo cáo " Tách dòng và biểu hiện gen mã hoá tiểu đơn vị P66 của enzyme phiên mã ngược của virus HIV – 1 "

Tách dòng và biểu hiện gen mã hoá tiểu đơn vị P66 của enzyme phiên mã ngược của virus HIV – 1 | Tạp chí Cóng nghệ Sinh học 5 4 463-470 2007 TACH DONG VA BIÊU HIỆN GEN MA HÓA TIÊU ĐƠN VỊ P66 CỦA ENZYME PHIÊN MÃ NGƯỢC CỦA VIRUS HIV-1 Phan Trọng Hoàng1 Ngô Văn Trường2 Lê Văn Son Lê Trần Bình Chu Hoàng Hà1 1 Viện Công nghệ sinh học Trường Dại học Bách khoa Đà ẵng TÓM TẮT Enzyme phiên mã ngược cùa virus gây suy giam miễn dịch ờ người dạng 1 the human immunodeficiency virus type 1 reverse transcriptase HIV-1 RT được cấu tạo từ hai tiều đơn vị riêng biệt có kích thước 66 và 51 kDa viết tảt là p66 và p51. Enzyme này được dịch mã và đóng góí trong các thể virus và được sinh ra từ polyprotein tiền chất gap-pol Prol60gap-pol . Các protease cùa hạt HIV sẽ thụy phân polyprotein tiên chát gap-pol này ớ cảc vị trí khác nhau để sinh ra hai tiểu đơn vị p66 p51. Tiêu đơn vị p66 có chứa vùng DNA polymerase và vùng RNase H. Để biểu hiện tiểu đơn vị này trong E. coli thiêu hệ protease của H1V chúng tôi tiên hành phân lập vùng gen mã hóa cho p66 dài 1680 bp với cặp mồi đặc hiệu HIV P66-M el-F HIV . tách dòng bằng vector pCR-HIV RT-p66 và đọc trình tự nucleotide. Tiều đơn vị p66 được gắn vào vector biểu hiện pET21a Novagen và được biểu hiện trong chủng K. coỉì rosetta-gamirM DE3 có hỗ trợ các bộ ba mã hiểm dưới sự càm ứng cùa 1PTG. Điều kiện tối ưu đế biếu hiện dư thừa p66 trong E. cơỉi nồng độ IPTG là 1 mM nhiệt độ cảm ứng là 30 C trong thời gian 5 h. Từ khóa Enzyme phiên mõ ngược tiéu đơn vị p5ỉ virus gáy suy giam miễn dịch ơ người dụng ỉ MỞ ĐÀU Enzyme phiên mã ngược của HIV-1 Human immunodeficiency virus type-1 reverse transcriptase có khả nâng tống hợp cDNA từ sợi RNA hệ gen của virus HIV. HIV-1 RT là một enzyme đa chức năng có 3 hoạt tính chính I tổng hợp sợi - DNA từ RNA tổng hợp sợi DNA dưới tác dụng cùa DNA polymerase phụ thuộc DNA và hoạt tính ribonuclease H Dufour et aỉ. 1998 . HIV-1 RT đóng vai trò trung tâm trong quá trình nhân lên cùa virus nên đây là đối tượng chính được nghiên cứu để tìm ra liệu pháp chổng HIV. Ờ Mỹ hiện nay có 07 chất ức chế enzyme

TỪ KHÓA LIÊN QUAN
crossorigin="anonymous">
Đã phát hiện trình chặn quảng cáo AdBlock
Trang web này phụ thuộc vào doanh thu từ số lần hiển thị quảng cáo để tồn tại. Vui lòng tắt trình chặn quảng cáo của bạn hoặc tạm dừng tính năng chặn quảng cáo cho trang web này.