tailieunhanh - Báo cáo " Xây dựng quy trình tái sinh đa chồi trực tiếp từ thân mầm cây cam sành ( Citrus nobilis Loureiro) phục vụ chuyển gen"

Xây dựng quy trình tái sinh đa chồi trực tiếp từ thân mầm cây cam sành ( Citrus nobilis Loureiro) phục vụ chuyển gen | Tạp chỉ Công nghệ Sinh học 5 3 363-370 2007 XÂY DỤNG QUY TRÌNH TÁI SINH ĐA CHÒI TRựC TIẾP TỪ THÂN MẦM CÂY CAM SÀNH citrus NOBILIS LOƯREIRO PHỤC vụ CHUYỂN GEN Đổ Tiến Phát1 Nguyễn Chi Mai1 Đặng Hòa Hiếu2 Lê Văn Sơn1 Chu Hoàng Hà1 Lê Trần Bình1 Viện Công nghệ Sinh học 2Trường Đại học Khoa học Tự nhiên Đại học Quổc gia Hà Nội TÓM TẮT Trong những năm gần đây việc chuyển gen vào cây cam quýt đã thu được thành công ở một số phòng thí nghiệm. Các phương pháp chuyển gen vào các cây thuộc họ cam quýt bao gồm Chuyển gen trực tiếp bằng dung họp tể bào trần gián tiếp thông qua Agrobacterium kết hợp nuôi cấy huyền phù tế bào và sử dụng súng bắn gen. Hiện nay chuyển gen gián tiếp thông qua Agrobacíerìum với nguyên liệu thân mầm và mô chưa thành thục là phương pháp chuyển gen hiệu quả nhất đối với các cây cam quýt. Mục đích của nghiên cứu này là xây dụng hệ thống tái sinh phục vụ công tác chuyển gen vào cây cam Sành bằng Agrobacỉerìum thônậ qua phương pháp tạo đa chồi trực tiếp từ thân mầm. Các bước chính cùa quy trình tái sinh đa chồi bao gôm thân mầm khoảng 20 - 25 ngày tuổi được cắt thành từng đoạn dài 10 mm sau đó dùng dao và panh bổ dọc đoạn thân. Mau cấy được đặt trên môi trường tái sinh cụm chồi bao gồm MS bổ sung 2 mg 1 BAP 5 đường và 8 g 1 agarose. Sau 3-4 tuần kéo dài chồi trên MS bổ sung 0 5 mg 1 NAA 0 1 mg l GA3 và 2 g 1 than hoạt tính. Chồi đơn có chiều cao 3 - 4 cm được tạo rễ trên môi trường MS bổ sung 0 5 mg 1 NAA. Cây con có bộ rễ hoàn chỉnh dược đưa ra trồng chăm sóc trên giá thê trấu hun trong điều kiện nhà lưới. Tỷ lệ tái sinh chồi thu được 98 5 hệ số nhân chồi đạt 8 6 chồi đoạn thân hiệu quả tạo rễ đạt 71 6 đưa cây thành công ra trồng và chăm sóc trong điều kiện nhà lưới. Từ khóa Cam Sành Citrus nobilis Loureiro tái sinh đa chồi thân mầm MỞ ĐẦU Citrus tên gọi chung cho các loại cây ăn quả có mủi đây là loại cây có giá trị dinh dưỡng và kinh tế cao. Mức tiêu thụ quả có múi bình quân đầu người trên thế giới đạt khoảng 16 kg vào năm 2000 FAO 2003 . Sản lượng quả