tailieunhanh - Báo cáo " Tinh sạch và khảo sát đặc điểm của các serine protease từ trùn quế (Perionyx excavatus)"

Tinh sạch và khảo sát đặc điểm của các serine protease từ trùn quế (Perionyx excavatus) | Tạp chí Công nghệ Sinh học 5 3 345-354 2007 TINH SẠCH VÀ KHẢO SÁT ĐẶC ĐIỂM CỦA CÁC SERINE PROTEASE TỪ TRÙN QUẾ PERIONYX EXCA VA TƯS Phan Thị Bích Trâm1 Dương Thị Hương Giang1 Hà Thanh Toàn1 Phạm Thị Ảnh Hồng1 ỉ ại học Cần Thơ Trường Đại học Khoa học Tự nhiên Đại học Quổc gia thành phổ Hồ Chỉ Minh TÓM TẮT Sáu phân đoạn protease FI FII FIII-1 FI 11-2 FIII-3 FIV cỏ hoạt tính thủy phân fibrin đã được tinh sạch từ trùn quế Perionyx excavatus bằng phưcmg pháp kết tủa acetone kết hợp với sắc ký trên cột trao đổi ion Unosphere Q cột tương tác kỵ nước Phenyl-Sepharose và cột lọc gel Sepharose 12. Quá trình tự phân giải trong thời gian 10 ngày ở nhiệt độ phòng có thể làm tăng hoạt tính protease của dịch trích ly lên gấp 2 lần so với hoạt tính ban đầu. Các phân đoạn protease nhận được có tính đặc hiệu cơ chất khác nhau trên cơ chất fibrin hoạt tính rất mạnh trong khoảng từ 44 1 đến 830 7 đơn vị plasmin mg protein với mức độ hoạt tính F11I-3 FIII-2 FI FỈII-1 FIV FII trên cơ chất casein hoạt tính protease yểu hơn trong khoảng từ 0 87 đến 1 81 tyrosine unit mg protein theo mức độ hoạt tính FI FIII-3 FI1 FIII-1 FIII-2 FIV. Điện di SDS-PAGE và sắc ký lọc gel cho thấy khối lượng phân tử của các protease này nằm trong khoảng từ 28 đến 35 kDa. Các phân đoạn FI FII FIII-2 Fill-3 có nhiệt độ tối ưu là 65 c riêng hai phân đoạn FIII-1 FIV có nhiệt độ tối ưu thấp hơn 60 C . pH 11 là pH tối ưu cho hoạt động của tất cả các phân đoạn. Tuy nhiên trừ FIII-1 5 phân đoạn còn lại có khả năng hoạt động cũng khá mạnh ở pH 7. Các protease nhận được bền ở nhiệt độ 50 C tương đối thấp hơn nhiệt độ tối ưu độ bền pH của chúng năm trong khoảng pH khá rộng từ 4 - 12. Do hoạt tính của các protease này bị ức chế bởi phenylmethyl sulfonyl fluoride PMSF nên có khả năng đây là các serine protease. Từ khóa đĩa fibrin Perionyx excavatus Phenyl Sepharose Sepharose 12 serine protease trùn quế Unosphere Q MỞ ĐẦU Một số bệnh liên quan đến tim mạch đang là vấn đề được quan tâm nhiều ở Việt Nam và thế giới. Trong đó .