tailieunhanh - TẠO TÁI TỔ HỢP ADN VP28 CỦA VI-RÚT GÂY BỆNH ĐỐM TRẮNG (WSSV) TRÊN TÔM SÚ

Vi-rút gây bệnh đốm trắng (WSSV) là một trong những vi-rút gây nguy hiểm cho tôm sú (Penaeus monodon). Mục tiêu của nghiên cứu nhằm tạo tái tổ hợp ADN của gen VP28 ở WSSV để sử dụng làm kháng nguyên cho việc phát triển kháng thể. Đoạn ADN của VP28 được khuếch đại từ vi-rút gây bệnh đốm trắng trên tôm sú thông qua biểu hiện vạch sáng đặc hiệu 516bp. Tiến hành phân cắt sản phẩm PCR bằng enzyme giới hạn BamHI và PstI, gắn kết với plasmid pUC18 bằng enzyme T4 DNA ligase. Tổ hợp VP28-pUC18 được biến nạp vào vi khuẩn Escherichia. | Tạp chí Khoa học 2012 22a 1-7 Trường Đại học Cần Thơ TẠO TÁI TỔ HỢP ADN VP28 CỦA VI-RÚT GÂY BỆNH ĐỐM tRắNG WSSV TRÊN TÔM SÚ Bùi Thị Bích Hằng1 ABSTRACT White spot syndrome virus WSSV is one of serious viruses in black tiger shrimp Penaeus monodon . The aim of this study was making recombinant DNA content of VP28 gene of WSSV for using as antigen to develop antibody. DNA fragment of VP28 was amplified from WSSV which infected to shrimp and showed specific band 516bp. PCR product was digested by restriction enzyme BamHI and PstI and cloned to plasmid pUC18 by T4 DNA ligase. Recombinant DNA VP28-pU18 was transformed to Escherchia coli XL1Blue the E. coli after transformation was examined and showed consisting DNA VP28 of WSSV Keywords WSSV recombinant DNA and restriction enzyme Title Development DNA recombinant VP28 of White Spot Syndrome Virus WSSV in black tiger shrimp TÓM TẮT Vi-rút gây bệnh đốm trắng WSSV là một trong những vi-rút gây nguy hiểm cho tôm sú Penaeus monodon . Mục tiêu của nghiên cứu nhằm tạo tái tổ hợp ADN của gen VP28 ở WSSV để sử dụng làm kháng nguyên cho việc phát triển kháng thể. Đoạn ADN của VP28 được khuếch đại từ vi-rút gây bệnh đốm trắng trên tôm sú thông qua biểu hiện vạch sáng đặc hiệu 516bp. Tiến hành phân cắt sản phẩm PCR bằng enzyme giới hạn BamHI và PstI gắn kết với plasmidpUC18 bằng enzyme T4 DNA ligase. Tổ hợp VP28-pUC18 được biến nạp vào vi khuẩn Escherichia coli XL1Blue tiến hành kiểm tra khuẩn lạc của vi khuẩn sau khi biến nạp cho thấy vi khuẩn có mang đoạn ADN VP28 của WSSV. Từ khóa WSSV tái tổ hợp ADN và enzyme giới hạn 1 GIỚI THIỆU Bệnh đốm trắng xuất hiện đầu tiên tại Đài Loan vào năm 1992 sau đó lan rộng ra nhiều nước trên thế giới Chou et al. 1995 . Bệnh do white spot syndrome virus WSSV gây ra vi-rút này hầu như gây bệnh trên tôm nước mặn và cả trên tôm nước ngọt đồng thời cũng nhiễm trên rất nhiều đối tượng giáp xác khác nhau Flegel 1997 Hossain 2001 . Với khả năng lan truyền bệnh và gây chết tôm hàng loạt bệnh đốm .