tailieunhanh - QUI TRÌNH NESTED-PCR PHÁT HIỆN VIRÚT GÂY BỆNH ĐỐM TRẮNG (WSSV) VÀ NỘI CHUẨN GIÁP XÁC MƯỜI CHÂN TRÊN NHIỀU ĐỐI TƯỢNG CẢM NHIỄM

Virút gây bệnh đốm trắng (WSSV), thuộc họ virus mới có tên gọi Nimaviridae, là một trong những nhóm tác nhân virus gây tổn thất nghiêm trọng cho người nuôi tôm. Để phát hiện WSSV, kỹ thuật PCR đã được thiết lập và cho thấy khả năng ứng dụng rất tốt. Trong nghiên cứu này, qui trình nested-PCR được thiết lập có tính nhạy và tính đặc hiệu cao, cho phép phát hiện WSSV và đoạn gen của giáp xác mười chân được sử dụng như là nội chuẩn của phản ứng. Sự kết hợp này là một trong những mục tiêu hàng đầu của. | Tạp chí Khoa học 2011 17a 1-8 Trường Đại học Cần Thơ QUI TRÌNH NESTED-PCR PHÁT HIỆN VIRÚT GÂY BỆNH ĐỐM TRẮNG WSSV VÀ NỘI CHUẨN GIÁP XÁC MƯỜI CHÂN TRÊN NHIỀU ĐỐI TƯỢNG CẢM NHIỄM Trần Thị Tuyết Hoa1 ABSTRACT White spot syndrome virus WSSV member of a new virus family called Nimaviridae is an important viral pathogen responsible for severe economic loss to shrimp farmers. Techniques for the detection of WSSV by polymerase chain reaction are well established and useful. In this study the nested-PCR protocol presents a sensitive and specific protocol for the detection of WSSV and decapod genes serving as internal control for the test. This combination is one of the specific objectives of the research. Primers named P1 P2 P3 and P4 Kimura et al. 1996 and primer pairs named Deca-20a2 and Deca-20s9 CSIRO 2008 were employed for the nested-PCR. This protocol can be used to detect low levels of WSSV in different hosts i Carriers and low viral load samples such as wild crabs post-larvae may also be tested for WSSV by this method ii this protocol may also be useful in confirming early stages of WSSV infection when the viral load is relatively low such as in a very light infection before the onset of disease. In term of high specificity the two-step PCR protocols were determined to have sensitivities less than 10pg of DNA template. Keywords white spot syndrome virus internal control nested-PCR Title A polymerase chain reaction protocol for the detection of white spot syndrome virus WSSV and decapod genes serving as internal control in various infected hosts TÓM TẮT Virút gây bệnh đốm trắng WSSV thuộc họ virus mới có tên gọi Nimaviridae là một trong những nhóm tác nhân virus gây tôn that nghiêm trọng cho người nuôi tôm. Đê phát hiện WSSV kỹ thuật PCR đã được thiết lập và cho thấy khả năng ứng dụng rất tốt. Trong nghiên cứu này qui trình nested-PCR được thiết lập có tính nhạy và tính đặc hiệu cao cho phép phát hiện WSSV và đoạn gen của giáp xác mười chân được sử dụng như là nội .