tailieunhanh - THỬ NGHIỆM CHUYỂN GEN KHÁNG SÂU TRÊN CÂY CÀ CHUA (LYCOPERSICON ESCULENTUM MILL.) IN VITRO BẰNG VI KHUẨN AGROBACTERIUM TUMEFACIENS

Môi trường tái sinh chồi cây cà chua in vitro từ lá mầm là MS có bổ sung 0,5 mg/l BA, 0,5 mg/l kinetin, 0,1 mg/l IAA, 8,4 g/l agar và pH 5,8; ngưỡng gây chết của kanamycin sulphate đối với lá mầm đối chứng là 100 mg/l. Việc biến nạp plasmid pCAMBIA 2301 – Cry1Ab vào Agrobacterium tumafaciens dòng LBA 4404 và kiểm tra gen Cry1Ab đã được thực hiện thành công với sản phẩm khuếch đại của gen Cry1Ab là 559 bp. Mật độ OD600nm = 1 và 100 μM acetosyringone cho tỷ lệ biểu hiện GUS cao nhất với 45,6 ± 5,1%. Kết. | Tạp chí Khoa học 2012 24a 39-48 Trường Đại học Cần Thơ THỬ NGHIỆM CHUYỂN GEN KHÁNG SÂU TRÊN CÂY CÀ Chua LYCOPERSICON ESCULENTUM MILL. IN VITRO BẰNG VI KHUẨN AGROBACTERIUM TUMEFACIENS Hà Trần Minh Dũng Dương Ngọc Kiều Thi1 Lê Tấn Đức và Nguyễn Hữu Hổ2 ABSTRACT The suitable regenerating medium for 10-day old cotyledon of tomato was MS containing mg l BA mg l kinetin mg l IAA and g l agar. pH was adjusted at . The lethal dose of kanamycin on cotyledonary segments control was 100 mg l. The introduction of plasmid pCAMBIA 2301 - CrylAb into Agrobacterium tumefaciens train LBA 4404 and the presence of Cry1Ab gene were tested by PCR technique. The OD600nm 1 and 100 M acetosyringone resulted in the highest transient GUS activity on transgenic cotyledonary fragments. The presence of Cry1Ab gene in 2-week old cotyledonary fragments and 3-month old transgenic tomato in vitro plants was evidenced by PCR. Keywords CrylAb gene Agrobacterium tumefaciens LBA 4404 Hong Chau tomato variety Lycopersicon esculentum Mill. Title Production of insects-resistant transgenic tomato plants via Agrobacterium tumefaciens TÓM TẮT Môi trường tái sinh chồi cây cà chua in vitro từ lá mầm là MS có bổ sung 0 5 mg l BA 0 5 mg l kinetin 0 1 mg l IAA 8 4 g l agar và pH 5 8 ngưỡng gây chết của kanamycin sulphate đối với lá mầm đối chứng là 100 mg l. Việc biến nạp plasmidpCAMBIA 2301 Cry1Ab vào Agrobacterium tumafaciens dòng LBA 4404 và kiêm tra gen Cry1Ab đã được thực hiện thành công với sản phẩm khuếch đại của gen Cry1Ab là 559 bp. Mật độ OD600nm 1 và 100 ịjM acetosyringone cho tỷ lệ biêu hiện GUS cao nhất với 45 6 5 1 . Kết quả PCR cho thấy có sự hiện diện của gen Cry1Ab ở một số lá mầm chuyên gen 2 tuần tuổi và lá cà chua 3 tháng tuổi. Từ khóa Gen Cry1Ab Agrobacterium tumefaciens LBA 4404 cà chua Hồng Châu Lycopersicon esculentum Mill. 1 MỞ ĐẦU Cà chua Lycopersicon esculentum Mill. là loại cây trồng được canh tác và tiêu thụ phổ biến trên thế giới. Diện tích cà chua trên .