tailieunhanh - NGHIÊN CỨU PHÂN TÍCH DNA BẰNG KĨ THUẬT PCR KẾT HỢP VỚI PHÉP ĐO ĐIỆN HOÁ

Trong những năm gần đây, Polymerase chain reaction (PCR) được sử dụng rộng rãi trong nghiên cứu về di truyền, phân tích pháp y, chuẩn đoán bệnh Sản phẩm PCR thông thường được phân tích bằng kĩ thuật điện di phức tạp, đắt tiền và tiêu tốn nhiều thời gian. Trong bài báo này, chúng tôi trình bày một phương pháp điện hoá đơn giản, sử dụng Hoechts 33258, một chất có hoạt tính điện hoá và có khả năng khuếch tán vào cấu trúc xoắn kép của DNA, làm chất chỉ thị điện hoá để xác định sự có. | NGHIÊN CỨU PHÂN TÍCH DNA BẰNG KĨ THUẬT PCR KẾT HỢP VỚI PHÉP ĐO ĐIỆN HOÁ A STUDY ON AN ELECTROCHEMICAL BASED DETECTION METHOD FOR DNA AMPLIFICATION USING PCR Nguyễn Bá Trung Trường Đại học Sư phạm trunghieu. osaka@gmail. com TÓM TẮT Trong những năm gần đây Polymerase chain reaction PCR được sử dụng rộng rãi trong nghiên cứu về di truyền phân tích pháp y chuẩn đoán bệnh. Sản phẩm PCR thông thường được phân tích bằng kĩ thuật điện di phức tạp đắt tiền và tiêu tốn nhiều thời gian. Trong bài báo này chúng tôi trình bày một phương pháp điện hoá đơn giản sử dụng Hoechts 33258 một chất có hoạt tính điện hoá và có khả năng khuếch tán vào cấu trúc xoắn kép của DNA làm chất chỉ thị điện hoá để xác định sự có mặt của sản phẩm PCR bằng phương pháp đo Linear Sweep Voltametry LSV trên hệ 3 điện cực DEP chip. Kết quả nghiên cứu cho thấy hiệu quả khuếch đại gen Beta Actin trong human DNA có thể được xác định hoàn toàn chính xác. So với phương pháp điện di phương pháp được lập dựng trong bài báo này nhanh chính xác và rẻ tiền hơn rất nhiều. Sự thành công của phương pháp này mở ra hướng ứng dụng trong phân tích y sinh nghiên cứu sinh học phân tử và kiểm định thực phẩm . Từ khóa Hoechts 33258 PCR Chỉ thị điện hoá Beta Actin DEP chip ABSTRACT In recent years Polymerase chain reaction PCR has been extensively used in genetic study forensic science and medical diagnosis. The PCR amplification product is normally analyzed by gel electrophoresis in agarose or polyacrylamide matrix which is a time consuming expensive and complicated method. In this work an electrochemical method is proposed for the PCR amplification detection using Hoechts 33258 an electro-active and dsDNA intercalating dye as an electrochemical indicator for qualitative analysis of DNA amplification in combination with Linear Sweep Voltammetry LSV on a three electrode DEP Disposable electrochemical printed chip. The result shows that the amplification of Beta Actin gene from human template DNA can be detected in a short .