tailieunhanh - Ứng dụng kỹ thuật PCR-SSP trong định nhóm HLA

Phức hệ chủ yếu hoà hợp mô ở ng-ời chiếm một vùng từ 4 đến 5 megabaes (Mb) trên cánh ngắn của nhiễm sắc thể số 6. Trong lịch sử, kháng nguyên bạch cầu ng-ời (HLA: Human leucocyt Antigen) đ-ợc xác định bằng huyết thanh học, sau đó là kỹ thuật tế bào, kỹ thuật tính đa dạng các do men hạn chế(Restriction Fragment Length Polymorphism: RFLP). Ngày nay, kỹ thuật đ-ợc sử dụng nhiều và có độ tin cậy cao là oligonucleotid probe. Phân tử HLA rất đa dạng, các kháng nguyên này gây ra c. miễn. | TCNCYH 23 3 2003 ỨNG DỤNG KỸ THUẬT PCR-SSP TRONG ĐỊNH NHÓM HLA TS. Bạch Khánh Hoà Labo trung tâm y sinh học Đại học Y Hà Nội Phức hệ chủ yếu hoà hợp mô ở người chiếm một vùng khoảng từ 4 đến 5 megabaes Mb trên cánh ngắn của nhiễm sắc thể số 6. Trong lịch sử kháng nguyên bạch cầu người HLA Human leucocyt Antigen được xác định bằng huyế t thanh học sau đó là kỹ thuật tế bào kỹ thuật tính đa dạng các mảnh do men hạn chế Restriction Fragment Length Polymorphism RFLP . Ngày nay kỹ thuật được sử dụng nhiều và có độ tin cậy cao là oligonucleotid probe. Phân tử HLA rất đa dạng các kháng nguyên này gây ra cả miễn dịch thể dịch và miễn dịch qua trung gian tế bào. Trong bài này chúng tôi trình bày kỹ thuật Phản ứng chuỗi polymerase với những mồi có trình tự đặc hiệu PCR- SSP Polymerase Chain Reaction - Sequence Specific Primers để định nhóm HLA nhằm mục đích sử dụng trong lâm sàng chọn hoà hợp người cho và người nhận tạng mà chúng tôi đã thực hiện ở Việt Nam từ 2000. 1. Mở đầu kháng nguyên miễn dịch bạch cầu của người human leucocyte antigen-HLA nằm một phần quan trọng trong hệ thống di truyền được gọi là hệ thống chủ yếu hoà hợp mô complex major histocompatibilite -CMH hệ thống này nằm trên cánh ngắn của nhiễm sắc thể số 6 đoạn . Lần đầu tiên hệ thống này được phát hiện bởi 1958 và ông đã được nhận giải thưởng Nobel về Y học năm 1980 1 . HLA có vai trò chủ đạo trong đáp ứng miễn dịch. Tính đa dạng trong câu trúc đã dần đến những khó khăn trong xác định kháng nguyên và hiểu biết về chức năng của nó ứng dụng trong lâm sàng. Vai trò của HLA trong sự nhận biết cái tôi và không phải tôi rất quan trọng trong ghép cơ quan ghép tuỷ cũng như đáp ứng miễn dịch ở mức độ peptit. Như vậy với những cấu trúc và chức năng khác nhau phân tử HLA giúp cho chúng ta hiểu ngày càng rõ hơn cơ chế đáp ứng miễn dịch. 2. Kỹ thuật định nhóm HLA trải qua nhiều giai đoạn kể từ khi phát minh ra hệ thống HLA cho đến nay có rất nhiều kỹ thuật đã được áp dụng trong việc xác định kháng .