tailieunhanh - Ứng dụng kỹ thuật PCR tìm gen DYZ1 để xác định NST Y cho các bệnh nhân chưa rõ giới tính

ở người và động vật có vú thì nhiễm sắc thể Y là một trong những nhiễm sắc thể ngắn nhất. Người ta đã tiến hành nghiên cứu trên một số cá thể có bộ nhiễm sắc thể: 46,XY; 47,XXY và 47,XYY đều có tinh hoàn và là nam. Trong khi đó 46,XX, 47,XXX và 45,XO có kiểu hình là nữ. Do đó, có thể kết luận là kiểu hình nam phụ thuộc vào nhiễm sắc thể Y. Ngày nay ngưòi ta đi sâu hơn và đã tìm ra ở nhánh ngắn của NST Y thì có gen mã cho yếu tố TDF (Testis Determining Factor = Yếu tố quyết. | ỨNG DỤNG KỸ THUẬT PCR TÌM GEN DYZ1 ĐỂ xác ĐỊNH NST Y CHO CÁC BỆNH NHÂN CHƯA RÕ GIỚI TÍNH Nguyễn Thanh Thuý1 Vũ Triệu An1 Văn Đình Hoa1 Nguyễn Thị Phương2 Vũ Chí Dũng2 1Bộ môn Miễn dịch - Sinh lý bệnh trường Đại học Y Hà Nội 2Khoa Nội tiết - Chuyển hoá - Di truyền Viện Bảo vệ sức khoẻ trẻ em Sau khi tiến hành PCR tìm gen TDF để chẩn đoán giới tính và đối chiếu với kết quả nuôi cấy NST cho 40 bệnh nhân thì thấy 95 phù hợp tức là có mặt song hành TDF và NST Y và ngược lại còn lại 5 2 bệnh nhân không phù hợp 46XX nhưng TDF và 46XY 46Xr X nhưng TDF - . Để khẳng định cho hai trường hợp này chúng tôi tiến hành PCR tìm gen DYZ là gen trên nhánh dài để phát hiện NST Y kết quả cho thấy không tìm thấy gen DYZ trên cả hai bệnh nhân này do đó kết luận là không có mặt NST Y. I. ĐẶT VẤN ĐỂ Ở người và động vật có vú thì nhiễm sắc thể Y là một trong những nhiễm sắc thể ngắn nhất. Người ta đã tiến hành nghiên cứu trên một số cá thể có bộ nhiễm sắc thể 46 XY 47 XXY và 47 XYY đều có tinh hoàn và là nam. Trong khi đó 46 XX 47 XXX và 45 XO có kiểu hình là nữ. Do đó có thể kết luận là kiểu hình nam phụ thuộc vào nhiễm sắc thể Y. Ngày nay ngưòi ta đi sâu hơn và đã tìm ra ở nhánh ngắn của NST Y thì có gen mã cho yếu tố TDF Testis Determining Factor Yếu tố quyết định tinh hoàn còn nhánh dài thì có gen mã cho sự sinh tinh trùng AZF Azoospermie factor các gen này chiếm khoảng 2 - 3 NST Y. Còn lại là các trình tự lặp đi lặp lại một cách đặc hiệu và chỉ có ở NST Y. Người ta gọi đó là vùng Heterochromatin gen DYZ nằm ở vùng này D DNA Y NST Y Z Repetive copy DNA -Đoạn lặp lại trên NST Y . Do NST Y có chức năng và cấu trúc đặc biệt như vậy nên việc xác định NST Y có vai trò quan trọng quyết định trong việc chẩn đoán giới tính. Năm 1972 Pearson và cs 4 bằng kỹ thuật nhuộm huỳnh quang các tế bào niêm mạc miệng tế bào metaphase đã thấy các tế bào lấy từ đối tượng là nam giới có bắt màu huỳnh quang ở nhánh dài NST Y người ta gọi đó là vật thể Y. Số lượng vật thể Y chính bằng số NST Y có trong