tailieunhanh - Giới thiệu kỹ thuật giải trình tự gen và Real - Time PCR

Giải trình tự gen là tìm ra trình tự sắp xếp của các nucleotides trên đoạn gen được quan tâm nhằm phát hiện sự đột biến gen hoặc để thiết kế gen mồi (primer) và các vector tách dòng (cloning) nhằm tạo ra các protein tái tổ hợp có giá trị cao trong Y học (vaccine, thuốc chữa bệnh, các sinh phẩm phục vụ chẩn đoán bệnh hoặc nghiên cứu khoa học ). Kỹ thuật giải trình tự gen được công bố năm 1975 bởi Sanger (nguyên lý enzym) và Maxam - Gilbert năm 1977 (nguyên lý phân giải hoá học). Hiện nay, các kỹ thuật này đã được cải tiến rất nhiều. | TCNCYH phụ bản 32 6 - 2004 GIỚI THIỆU KỸ THUẬT GIẢI TRÌNH Tự GEN VÀ REAL - TIME PCR Lê Văn Phủng Trường Đại học Y Hà Nội 1. Kỹ thuật giải trình tự gen Giải trình tự gen là tìm ra trình tự sắp xếp của các nucleotides trên đoạn gen được quan tâm nhằm phát hiện sự đột biến gen hoặc để thiết kế gen mồi primer và các vector tách dòng cloning nhằm tạo ra các protein tái tổ hợp có giá trị cao trong Y học vaccine thuốc chữa bệnh các sinh phẩm phục vụ chẩn đoán bệnh hoặc nghiên cứu khoa học. . Kỹ thuật giải trình tự gen được công bố năm 1975 bởi Sanger nguyên lý enzym và Maxam -Gilbert năm 1977 nguyên lý phân giải hoá học . Hiện nay các kỹ thuật này đã được cải tiến rất nhiều nhờ những tiến bộ mới về khoa học và công nghệ Hoá học Vật lý Điện tử và Công nghệ thông tin làm cho hiệu suất của việc giải trình tự gen ngày một cao người ta có thể giải một trình tự dài hàng nghìn cặp base chỉ trong vòng vài tiếng đồng hồ điều mà trước đây phải làm hàng tuần. Có nhiều kỹ thuật giải trình tự gen sau đây xin giới thiệu một kỹ thuật hiện nay đang được áp dụng phổ biến thông qua một ví dụ cụ thể giải mã gen FliC. Gen FliC là gen mã hoá cho kháng nguyên lông protein pha I của vi khuẩn Salmonella. Các Salmonella có lông thì đều có kháng nguyên này nhưng tính đặc hiệu thì khác nhau ở mỗi loài. Sự khác nhau này là do mã hoá khác nhau trình tự các nucleotides khác nhau ở gen FliC quy định. Chính vì vậy giải được trình tự gen FliC sẽ cho phép thiết kế được các gen mồi đặc hiệu cho từng loài Salmonella nhằm phát triển các kỹ thuật sinh học phân tử chẳng hạn PCR để chẩn đoán đặc hiệu cho từng loài hoặc phục vụ cho các nghiên cứu tìm kiếm vaccine có độ đặc hiệu và công hiệu cao. Để giải trình tự được gen FliC bước đầu tiên là phải thiết kế cặp mồi đặc hiệu. Cặp mồi này đã được thiết kế tại Labo trung tâm Y Sinh học được đặt tên là FliC_b_seqF aag cgg cta ttt cgc cgc c 19 nucleotides và FliC_b_SeqR cgt gtc ggt gaa tca atc gc 20 nucleotides . Các trình tự này đã được gửi đi tổng hợp thành các .

TÀI LIỆU LIÊN QUAN
TÀI LIỆU MỚI ĐĂNG
crossorigin="anonymous">
Đã phát hiện trình chặn quảng cáo AdBlock
Trang web này phụ thuộc vào doanh thu từ số lần hiển thị quảng cáo để tồn tại. Vui lòng tắt trình chặn quảng cáo của bạn hoặc tạm dừng tính năng chặn quảng cáo cho trang web này.