tailieunhanh - Định vị miễn dịch hiển vi điện tử các kháng nguyên mặt ngoài bằng kỹ thuật Gins

GINS là kỹ thuật miễn dịch hiển vi điện tử, kết hợp kỹ thuật đánh dấu miễn dịch gián tiếp với kỹ thuật nhuộm âm để nghiên cứu kháng nguyên mặt ngoài của các mẫu hạt vi sinh vật như vi rút, vi khuẩn, các mảnh vỡ tế . Nghiên cứu ứng dụng kỹ thuật này trên vắc xin viêm não Nhật Bản, vắc xin viêm gan B và vi khuẩn salmonella. Những kết quả chứng tỏ rằng các mẫu trên không những có cấu trúc hoàn chỉnh mà kháng nguyên mặt ngoài có tính đặc hiệu cao. | TCNCYH 27 1 - 2004 ĐỊNH VỊ MIỄN DỊCH HIEN vi ĐIỆN TỬ CÁC KHÁNG NGUyÊN MẶT NGOÀI BẰNG KỸ THUẬT GINS Nguyễn Kim Giao Viện Vệ sinh Dịch tễ Trung ương GINS là kỹ thuật miễn dịch hiển vi điện tử kết hợp kỹ thuật đánh dấu miễn dịch gián tiếp với kỹ thuật nhuộm âm để nghiên cứu kháng nguyên mặt ngoài của các mẫu hạt vi sinh vật như vi rút vi khuẩn các mảnh vỡ tế . Nghiên cứu ứng dụng kỹ thuật này trên vắc xin viêm não Nhật Bản vắc xin viêm gan B và vi khuẩn salmonella. Những kế t quả chứng tỏ rằng các mẫu trên không những có cấu trúc hoàn chỉnh mà kháng nguyên mặt ngoài có tính đặc hiệu cao I. ĐẶT VẤN ĐỀ Miễn dịch hiển vi điện tử IEM là sự kế t hợp kỹ thuật miễn dịch với kỹ thuật hiển vi điện tử để định vị các thành phần miễn dịch đặc hiệu các đại phân tử sinh vật. Khi mà hoá mô miễn dịch sử dụng hiển vi quang học để nghiên cứu phản ứng miễn dịch xẩy ra ở mức mô và tế bào thì hoá miễn dịch tế bào sử dụng EM để nghiên cứu phản ứng miễn dịch xẩy ra ở mức các đại phân tử và siêu cấu trúc tế bào. Nhờ kỹ thuật miễn dịch hiển vi điện tử có thể xác định vị trí của các chất như định vị các protein đặc hiệu trong hoặc trên mặt vi khuẩn tế bào bào quan dò tìm các kháng nguyên mặt ngoài của vi rút định vị các chuỗi DNA hoặc RNA đặc hiệu trong các tế . Hiện nay phương pháp miễn dịch hiển vi điện tử bao gồm nhiều kỹ thuật sử dụng những thiết bị và hoá chất chuyên dụng khác nhau đã được ứng dụng rộng rãi. Kỹ thuật miễn dịch hiển vi điện tử được ứng dụng tại phòng thí nghiệm hiển vi điện tử của Viện Vệ sinh dịch tễ trung ương VSDTTU là kết hợp kỹ thuật miễn dịch với kỹ thuật nhuộm âm và kỹ thuật lát cắt siêu mỏng sau đúc. Trong bài này chúng tôi trình bầy việc ứng dụng kỹ thuật đánh dấu miễn dịch gắn vàng gián tiếp với kỹ thuật nhuộm âm bản và gọi tắt là kỹ thuật GINS. II. VẬT LIÊU THIẾT BỊ VÀ PHƯQNG PHÁP 1. Vật liệu và mẫu - Vật liệu gồm lưới niken với màng đỡ phủ các bon và các hoá chất là glutaraldehyde đệm PBS BSA ammonium acetate uranyl acetate uranyl formate - Mẫu .