tailieunhanh - Phát triển và ứng dụng kỹ thuật PCR đa mồi trong chẩn đoán E. coli gây tiêu chảy từ phân Đọc thêm thuvienykhoa.vn

Tiêu chảy lμ một vấn đề sức khoẻ toμn cầu. Bệnh hay gặp ở trẻ em. ở các n−ớc đang phát triển, có ít nhất 1 tỷ tr−ờng hợp tiêu chảy hμng năm vμ số tử vong lμ 5 đến 7 triệu. Trung bình một năm một trẻ mắc 3,3 lần tiêu chảy. Tại Việt Nam, một số nghiên cứu cho thấy, số lần bị tiêu chảy trong một năm đối với một trẻ từ 2,2 – 6. Tại các n−ớc công nghiệp phát triển, tiêu chảy vẫn còn phổ biến ở trẻ em, ng−ời giμ vμ các khách du. | ________________________________TCNCYH 23 3 2003 PHÁT TRIỂN VÀ ỨNG DỤNG KỸ THUẬT PCR ĐA Mổl TRONG CHẨN ĐOÁN E. CQLI GÂY TIÊU CHẢY TỪ PHÂN Nguyễn Vũ Trung1 Lê Huy Chính1 Lê Vân Phủng1 Andrej Weintraub2 Bộ môn Vi sinh Đại học Y Hà Nội 2Khoa Vi sinh -Miễn dịch -Bệnh học Bệnh viện Huddinge Viện Karolinska-Thuỵ Điển Kỹ thuật PCR đa mồi lần đầu tiên được nghiên cứu thành công ở Việt nam bằng cách phối hợp 8 cặp mồi để chẩn đoán 5 loại E. coli gây tiêu chảy ETEC EHEC EIEC EPEC EAEC từ phân trẻ em dưới 5 tuổi bị tiêu chảy. Kỹ thuật này cho phép chẩn đoán chính xác 5 loại E. coli gây tiêu chảy chỉ bằng một phản ứng PCR với độ nhạy và độ đặc hiệu gần 100 và tiết kiệm nguyên vật liệu thời gian gấp 5 lần so với tiế n hành từng phản ứng PCR riêng biệt. Qua phân tích 310 bệnh phẩm phân tiêu chảy 90 chủng E. coli gây bệnh đã được phân lập chiế m 29 04 tổng số các bệnh phẩm. Trong đó EAEC là 58 chủng chiếm 18 71 ETEC 2 chủng 0 65 EPEC 24 chủng 7 7 và EIEC 6 chủng 1 94 . I. ĐẶT VẤN ĐỀ Tiêu chảy là một vấn đề sức khoẻ toàn cầu. Bệnh hay gặp ở trẻ em. Ở các nước đang phát triển có ít nhất 1 tỷ trường hợp tiêu chảy hàng năm và số tử vong là 5 đến 7 triệu. Trung bình một năm một trẻ mắc 3 3 lần tiêu chảy. Tại Việt Nam một số nghiên cứu cho thấy số lần bị tiêu chảy trong một năm đố i với một trẻ từ 2 2 - 6. Tại các nước công nghiệp phát triển tiêu chảy vần còn phổ biến ở trẻ em người già và các khách du lịch đến các nước đang phát triển. Có nhiều nguyên nhân dần đến tiêu chảy. Trong đó vi khuẩn đóng vai trò quan trọng. Trong số các vi khuẩn gây tiêu chảy E. coli hiện nay là căn nguyên nổi trội thu hút được sự quan tâm của các bác sĩ lâm sàng nhi khoa vi sinh vì nó là căn nguyên của 1 3 số trường hợp tiêu chảy. Việc chẩn đoán gặp khó khăn vì các triệu chứng lâm sàng không đặc hiệu. Có 5 loại E. coli gây tiêu chảy được phân loại theo các cơ chế gây bệnh khác nhau dựa trên các gien nằm trong tế bào vi khuẩn mã hoá cho các yếu tố độc lực Enteropathogenic E. coli EPEC enterohemorrhagic E. .