tailieunhanh - Góp phần nghiên cứu và ứng dụng kỹ thuật PCR đa mồi (Multiplex) trong phân loại Escherichia Coli gây tiêu chảy

Tiêu chảy là một bệnh khá phổ biến ở các nước trên thế giới, đặc biệt tại các nước đang phát triển. Tỷ lệ mắc và tử vong do tiêu chảy rất cao ở trẻ em. Theo ước tính của Tổ chức Y tế thế giới (WHO), hàng năm có trên 1 tỷ lượt trẻ em dưới 5 tuổi bị tiêu chảy với gần 5 triệu trẻ tử vong [5]. ë nước ta, tiêu chảy là nguyên nhân quan trọng gây suy dinh d−ỡng, là nguyên nhân gây tử vong đứng hàng thứ 2 ở trẻ em (chỉ xếp sau. | TCNCYH 22 2 - 2003 GÓP PHAN NGHIÊN cứu VÀ ỨNG DỤNG KỸ THUẬT PCR ĐA Mổl MULTIPLEX TRONG PHÂN LOẠI ESCHERICHIA CoLi GÂY TIÊU CHẢY Trần Trí Tuệ1 Lê Vân Phủng2 1 Trung tâm Y tế dự phồng Lào cai 2Đại học Y Hà Nội Độ nhạy và độ đặc hiệu của phản ứng PCR đa mồi trong xác định các chủng E. coli gây tiêu chảy đã được nghiên cứu chi tiết. Sự phân bố của 300 chủng E. coli phân lập từ các bệnh phẩm phân 150 nước tiểu 40 máu 30 dịch mật 40 mủ 40 cũng đã được xác đinh bằng PCR đa mồi dùng trong tiêu chảy. ADN được tách chiết từ các chủng E. coli và các chủng chuẩn khác thuộc Enterobacteriaceae sau đó tiến hành phản ứng PCR với 8 cặp mồi. Kế t quả như sau 1. Độ nhạy của phản ứng PCR đa mồi 8 cặp so với chủng chuẩn là 100 . 2. Độ đặc hiệu của phản ứng PCR với 8 cặp mồi đã chọn từ các vi khuẩn Citrobacter freundii Salmonella typhi Proteus vulgaris Klebsiella pneumoniae Enterobacter aerogenes Edwasdsiella tarda Escherichia coli ATCC 25922 là 100 . 3. Không phân biệt được EIEC với Shigella bằng phản ứng PCR với bộ mồi đã thiết kế cho EIEC Jal. 4. Các chủng E. coli gây tiêu chảy được phân lập từ trẻ em khoẻ mạnh là 10 EAEC 6 7 EHEC 0 66 EIEC 1 33 ePec 0 Etec 1 33 . 5. Các chủng E. coli gây tiêu chảy được phân lập từ mủ dịch mật máu nước tiểu là 1 33 và có sự phân bố không đồng đều theo vị trí gây bệnh. I. ĐẶT VẤN ĐỀ Tiêu chảy là một bệnh khá phổ biến ở các nước trên thế giới đặc biệt tại các nước đang phát triển. Tỷ lệ mắc và tử vong do tiêu chảy rất cao ở trẻ em. Theo ước tính của Tổ chức Y tế thế giới WHO hàng năm có trên 1 tỷ lượt trẻ em dưới 5 tuổi bị tiêu chảy với gần 5 triệu trẻ tử vong 5 . Ở nước ta tiêu chảy là nguyên nhân quan trọng gây suy dinh dưỡng là nguyên nhân gây tử vong đứng hàng thứ 2 ở trẻ em chỉ xếp sau nhiễm khuẩn đường hô hấp . Nhiều tác nhân vi sinh vật khác nhau có thể gây ra tiêu chảy trong đó Escherichia coli thường chiếm tỷ lệ cao. Theo nghiên cứu của các tác giả trên thế giới tỷ lệ E. coli gây tiêu chảy ở trẻ em từ 21-60 còn ở Việt Nam tỷ lệ này là 23 4 - .