tailieunhanh - Giáo trình Thực tập Vi sinh vật học: Phần 2

Phần 2 giáo trình "Thực tập Vi sinh vật học" gồm các bài thực hành: Đo sinh trưởng của vi sinh vật, nhu cầu về dinh dưỡng và điều kiện sinh trưởng của VSV, vi khuẩn chỉ thị độ nhiễm bẩn nước, vi sinh vật đất, vi khuẩn lactic và sữa, quan hệ giữa VSV với thực vật và người. | BÀI 9. ĐO SINH TRƯỞNG CỦA VI SINH VẬT Có thể định nghĩa sinh trưởng là sự tăng số lượng vật chất tế bào. Tuy nhiên cần phân biệt sự khác nhau giữa sinh trưởng của quần thể population growth - sự tăng sô lượng hoặc sinh khối của quần thể và sự sinh trưởng của tế bào cellular growth - sự tầng kích thước hoặc sinh khối của 1 tế bào . Sinh trưỏng của vsv thường được hiểu là sự sinh trưởng của 1 quần thể tế bào. Trong một hệ thống đóng không có chất dinh dưõng thêm vào không có sản phẩm trao đổi chất được rút ra giôhg như bình nuôi VSV sinh trưởng của vsv được đặc trưng bỏi đường cong sinh trưởng bao gồm 4 pha pha ỉag pha log pha ổn định stationary phase N pha tử vong death phase . Khi đo sinh trưởng của một quần thể tế bào vi khuẩn việc quan trọng nhất là xác định sự thay đổi về số lượng tế bào có trong môi trưdng nuôi cấy tại các thời điểm khác nhau. Số lượng tế bào vi khuẩn được xác định trực tiếp trên phòng đếm vi khuẩn hoặc gián tiếp nhờ phép đo độ đục và đếm số khuẩn lạc trên môi trường đặc. Dựa vào sô 1 ệu thu được vẽ đường biểu diễn mối tương quan giữa số lượng tế bào với thời gian đường cong sinh trưỏng để xác định sinh trưồng của quần thể qua các pha tính toán sô thê hệ thơi gian thế hệ tốc độ sinh trưỏng. Để đo sinh trưởng của quần thể tế bào cò dạng sợi như nấm mốc xạ khuẩn người ta thường sử dụng một sô phương pháp đặc biệt xác định trọng lượng tươi hoặc khô biomass định lượng protein ADN ARN hoặc một vài sản phẩm trao đổi chất đặc trưng. 78 CÁC PHƯƠNG PHÁP Xj c ĐỊNH số LƯỢNG TỂ BÀO vsv THÔNG DỤNG . ĐẾM TRỰC TIẾP DƯỚI KÍNH HIEN VI Phòng đếm Petroff-Hausser được dùng để đếm tế bào vi khuẩn. Phòng đếm hồng cầu Thoma Goriaev được dùng để đếm tế bào nấm men và phần lớn các eucariot đơn bào. Cách sử dụng các loại phòng dếm này là giôhg nhau. Nguyên tắc chung đếm số lượng tế bào có trong một đơn vị thể tích của phòng đếm từ đó suy ra số lượng tế bào có trong 1 ml nhán vói độ pha loãng dể biết số tế bào có trong dịch ban đầu. Phòng đem Petroíĩ-Hausser có 25 ô .